动物细胞培养技术概述

一、动物细胞培养基本概念

动物细胞培养是用无菌操作的方法从动物体分离得到细胞，将它们置于模拟动物体内生理条件的人工环境中，在体外进行培养并使其继续生长的过程。人们借以该技术可以观察细胞的生长、繁殖、细胞分化以及细胞衰老等生命现象。动物细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞群。

二、动物细胞培养分型

根据离体培养细胞在培养皿中是否贴壁生长，分为贴壁型和悬浮型。

(一) 贴壁型

培养细胞需要贴在支持物上生长，大多数细胞属于此类型。贴壁生长以后分化就变得不太显著，易失去原有细胞组织特性，形态上表现单一化，失去其在体内原有的一些特征，并且反映出其在胚层起源情况，判断细胞形态时不能按照体内组织学标准判定，仅大致分成以下类型：
1、成纤维型细胞：(fibroblast)

2、上皮型细胞(epithlium  cell type)

3、游走型细胞(wandering  cell type)

4、多形型细胞(polymorphic  cell type)

三、培养细胞的生命期

指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。在培养体系中，单个细胞表现有很大的独立性。但一个有活力的细胞必须通过细胞周期进行倍增，繁殖成群体，群体细胞是培养细胞的基本存在形式，而且在形态和机能上相互依存。

单个细胞生长周期（细胞周期）：

体外培养的细胞生长过程一般为3个阶段：
1）原代培养期（约为 1～4 周）
细胞移动活跃,但分裂不旺盛,多呈二倍体核型。原代细胞与体内原组织形态结构和功能活动基本相似。各细胞的遗传性状互不相关，细胞相互依存性强，如果把这种细胞稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养,细胞克隆的形成率下降，表明细胞独立生存性差。
2）传代期
细胞增殖旺盛，并维持二倍体核型，也叫二倍体细胞系。为了保存二倍体细胞性质，细胞应在初代或传代早期冻存为好。传代大约数天至一周可重复一次，持续数月，即为细胞系，一般为有限细胞系。
3）衰退期
细胞仍生长，增殖减慢，不增殖，进而衰退凋亡。
注意：细胞在三期中的任何一期（一般发生在传代后期或衰退期）在某些因素影响下,
如血清质量不佳、病毒污染、温度和 pH 不稳等,细胞可能发生自发转化。
细胞可能获得永生性。细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体称为连续细胞系。而细胞获得不死性后,细胞核型大多变成异倍体接触抑制消失。至今，国际以及国内已经建立了许多细胞系，大多数来自肿瘤细胞。
四、细胞培养的应用
细胞培养技术目前已广泛地被应用于生物学的各个领域。
1、基础科学研究
(1) 细胞生物学
(2) 基因功能学科
(3) 遗传学
2、药物研究与开发
(1) 新药筛选：如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2) 疫苗研究与开发：如病毒性疫苗的研究与开发（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3) 基因工程药物生产：如临床上一些具有治疗价值的细胞生长因子（干扰素）的研发与应用。
(4) 细胞工程药物生产：生物活性多肽研究与开发，人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5) 单克隆抗体制备：包括诊断用单克隆抗体，治疗用单克隆抗体。

目前，动物细胞生产的各类疫苗，单抗，干扰素等，已占据了大部分市场。随着细胞培养技术的发展，会有更多具有医药价值的生物制品问世，造福于人类。

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