​鬼笔环肽染色

鬼笔环肽（又称鬼笔鹅膏素）是一种双环七肽毒素，能选择性的与动植物体内的肌动蛋白结合，其作用与细胞松弛素Ｂ恰好相反，只与聚合的微丝结合，而不与肌动蛋白单体分子结合，使鬼笔环肽染色成为研究细胞内肌动蛋白微丝的有力工具，是细胞骨架的染色神器且广泛应用于生物化学、免疫学、分子生物学、病理学、诊断学等方面。

常见问题：

1、鬼笔环肽的分子量小，容易通过细胞，不需要对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。

2、药品价格昂贵。

3、鬼笔环肽毒性较大，需配戴手套操作。

4、在使用盖玻片上的细胞染色时，尽量将盖玻片置于有盖子的容器中以减少蒸发。

5、避免使用含有甲醇或丙酮的固定剂，这些会破坏肌动蛋白的结构而影响鬼笔环肽染色效果。

染色步骤：

此处以MG-63细胞爬片为例简述鬼笔环肽染色步骤：

将MG-63细胞接种在放置玻片的培养基中，37℃、5%CO2恒温培养箱中进行培养；

细胞培养至80-90%满时，用37℃预热的1×PBS（pH 7.4）清洗细胞2次；

使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定，室温固定10min，用PBS清洗细胞2~3次，每次10min；用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min；用PBS清洗细胞2~3次，每次10min；

取200µL配制好的罗丹明标记鬼笔环肽工作液，覆盖住盖玻片上的细胞，室温避光孵育30min；

用PBS清洗盖玻片3次，每次5min；

使用200µL DAPI溶液（浓度：100 nM）对细胞核进行复染，约30s；

共聚焦显微镜或荧光显微镜下观察采集图像。

具体沟通：400-9688-170

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