裸鼠成瘤操作方法是什么？

肿瘤细胞和癌细胞

　　肿瘤细胞有良性和恶性之分；癌细胞则是恶性，是会扩散的细胞。肿瘤细胞包含癌细胞，它们共同特点是从基因水平上失控的、能无限增殖的细胞。癌细胞有三个显著的基本特征即：不死性、迁移性和失去接触抑制。

　　实验室常用成瘤细胞

　　常规较容易成瘤的细胞：Hep-G2（肝癌），Hep2（喉癌），NCI-H460(大细胞肺癌)， A431(表皮癌)，SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌）SKBR3， A375/B16-F10（人黑色素瘤细胞），SGC7901 人胃肿瘤细胞 ，KB人口腔表皮样癌细胞可以成瘤但是比较慢的细胞： CNE（鼻咽癌），A549（肺癌）， SPC-A-1（肺腺癌）， HT-29（结肠癌），BEL-7402（肝癌），MDA-MB-231 乳腺癌 ， CT26 （小鼠结肠癌细胞 ），SH-SY5Y (人神经母细胞瘤细胞 ) ， U251 （人胶质瘤细胞） ， BGC-823（人胃癌细胞） ，PC-3 （人前列腺癌细胞）

　　一些比较有争议的细胞： Hela（宫颈癌），HCT（人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞）。其他：BMSC（骨髓间充质干细胞）认识裸鼠 无胸腺裸鼠（Nude Mouse，简称裸鼠）。目前已成为医学生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。特别是在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方面，它有着特殊的价值。 裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。杂合子小鼠（nn/+）各方面表现都正常。

　　小鼠中有若干突变基因，它可产生一种为无毛的表现（phenotype），例如无胸腺裸鼠（Nude）、裸鼠（Naked）、无毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol），不要把这些突变鼠基因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型，因此，不能将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。

　　裸小鼠：抵抗力差，易在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、 饮水患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。 裸大鼠： 一般特征似裸小鼠，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。

      裸小鼠

      裸大鼠

　　裸鼠的选择

　　虽然说以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取血量多，可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸大鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/c-nu裸小鼠。

　　随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用4--6周龄的裸鼠。

接种部位消毒

              排空入针口

       接种后观察（肿瘤）

       尾静脉注射给药

<span font-size:medium;white-space:normal;background-color:#ffffff;"="" style="box-sizing: border-box; margin: 0px; padding: 0px; color: rgb(26, 26, 26);">       裸鼠活体荧光

　　肿瘤细胞和癌细胞

　　肿瘤细胞有良性和恶性之分；癌细胞则是恶性，是会扩散的细胞。肿瘤细胞包含癌细胞，它们共同特点是从基因水平上失控的、能无限增殖的细胞。癌细胞有三个显著的基本特征即：不死性、迁移性和失去接触抑制。

　　实验室常用成瘤细胞

　　常规较容易成瘤的细胞：Hep-G2（肝癌），Hep2（喉癌），NCI-H460(大细胞肺癌)， A431(表皮癌)，SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌）SKBR3， A375/B16-F10（人黑色素瘤细胞），SGC7901 人胃肿瘤细胞 ，KB人口腔表皮样癌细胞可以成瘤但是比较慢的细胞： CNE（鼻咽癌），A549（肺癌）， SPC-A-1（肺腺癌）， HT-29（结肠癌），BEL-7402（肝癌），MDA-MB-231 乳腺癌 ， CT26 （小鼠结肠癌细胞 ），SH-SY5Y (人神经母细胞瘤细胞 ) ， U251 （人胶质瘤细胞） ， BGC-823（人胃癌细胞） ，PC-3 （人前列腺癌细胞）

　　一些比较有争议的细胞： Hela（宫颈癌），HCT（人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞）。其他：BMSC（骨髓间充质干细胞）认识裸鼠 无胸腺裸鼠（Nude Mouse，简称裸鼠）。目前已成为医学生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。特别是在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方面，它有着特殊的价值。 裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。杂合子小鼠（nn/+）各方面表现都正常。

　　小鼠中有若干突变基因，它可产生一种为无毛的表现（phenotype），例如无胸腺裸鼠（Nude）、裸鼠（Naked）、无毛鼠（Hairless）、无鼻毛鼠（Rhinol），不要把这些突变鼠基因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型，因此，不能将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。

　　裸小鼠：抵抗力差，易在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、 饮水患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。 裸大鼠： 一般特征似裸小鼠，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。

　　裸鼠的选择

　　虽然说以裸大鼠代替裸小鼠，具有移植肿瘤大，取血量多，可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸大鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/c-nu裸小鼠。

　　随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用4--6周龄的裸鼠。

　　裸鼠成瘤

　　裸鼠活体荧光

　　注意事项

　　（1）首先你要确定你的细胞能否成瘤，或者说成瘤效果好不好！这个一定要多查查文献

　　（2）细胞接种量1*107/200ul/只，或者浓缩为1*107/100ul/只，根据肿瘤细胞成瘤效果调整细胞量，最高不要超过1*107。接种肿瘤实验一般采用4--6周龄的裸鼠，裸鼠太老会加大成瘤难度，放大个体差异。

　　（3）接种的部位，根据个人经验，背部、腋下、颈部均可以，当然腋下和颈部效果最好。

　　（4）接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针，要保证与接种点的距离小于针头的长度，向头部方穿行，绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层，接种最好在1小时之内完成，可以预先将细胞放在冰盒里暂为保存

　　（5）鼠皮下种瘤后，可以通过应用免疫抑制剂，比如环磷酰胺（2mg每只，打两天）来加速瘤体的生长（我们实验室没试过）。

　　（6）一般一周到两周即可观察到是否成瘤成功。成瘤成功后，我们实验室常规采用隔天测量肿瘤，最后再汇集数据绘制肿瘤生长曲线（如客户有要求另论）。

　　（7）最后，不要担心裸鼠承受不了，大胆的的接种，要勤观察记录肿瘤生长情况以及裸鼠情况，成瘤很快，后续的记录和测量很慢。