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裸鼠成瘤操作方法是什么?

发布日期:2022-03-21 15:40:35 浏览次数:

肿瘤细胞和癌细胞

  肿瘤细胞有良性和恶性之分;癌细胞则是恶性,是会扩散的细胞。肿瘤细胞包含癌细胞,它们共同特点是从基因水平上失控的、能无限增殖的细胞。癌细胞有三个显著的基本特征即:不死性、迁移性和失去接触抑制。

  实验室常用成瘤细胞

  常规较容易成瘤的细胞:Hep-G2(肝癌),Hep2(喉癌),NCI-H460(大细胞肺癌), A431(表皮癌),SK-OV-3(卵巢癌),MCF-7(乳腺癌)SKBR3, A375/B16-F10(人黑色素瘤细胞),SGC7901 人胃肿瘤细胞 ,KB人口腔表皮样癌细胞可以成瘤但是比较慢的细胞 CNE(鼻咽癌),A549(肺癌), SPC-A-1(肺腺癌), HT-29(结肠癌),BEL-7402(肝癌),MDA-MB-231 乳腺癌 , CT26 (小鼠结肠癌细胞 ),SH-SY5Y (人神经母细胞瘤细胞 ) , U251 (人胶质瘤细胞) , BGC-823(人胃癌细胞) ,PC-3 (人前列腺癌细胞)

  一些比较有争议的细胞 Hela(宫颈癌),HCT(人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞)。其他:BMSC(骨髓间充质干细胞)认识裸鼠 无胸腺裸鼠(Nude Mouse,简称裸鼠)。目前已成为医学生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。特别是在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方面,它有着特殊的价值。 裸鼠(纯合子nu/nu突变鼠)主要表现为无毛(但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡)以及缺乏正常胸腺。杂合子小鼠(nn/+)各方面表现都正常。

  小鼠中有若干突变基因,它可产生一种为无毛的表现(phenotype),例如无胸腺裸鼠(Nude)、裸鼠(Naked)、无毛鼠(Hairless)、无鼻毛鼠(Rhinol),不要把这些突变鼠基因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型,因此,不能将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。

  裸小鼠:抵抗力差,易在SPF环境下可生存,所用的笼具、垫料、饲料、 饮水患病毒性肝炎和肺炎,因而饲养和繁殖要求条件比较严格,等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养,以保证长期存活并进行繁殖。 裸大鼠: 一般特征似裸小鼠,但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛,头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。


      裸小鼠


      裸大鼠

  裸鼠的选择

  虽然说以裸大鼠代替裸小鼠,具有移植肿瘤大,取血量多,可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定优越性,其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高,另外裸大鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/c-nu裸小鼠。

  随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加,故接种肿瘤实验一般采用4--6周龄的裸鼠。

接种部位消毒


              排空入针口


       接种后观察(肿瘤)


       尾静脉注射给药


<span font-size:medium;white-space:normal;background-color:#ffffff;"="" style="box-sizing: border-box; margin: 0px; padding: 0px; color: rgb(26, 26, 26);">       裸鼠活体荧光

  肿瘤细胞和癌细胞

  肿瘤细胞有良性和恶性之分;癌细胞则是恶性,是会扩散的细胞。肿瘤细胞包含癌细胞,它们共同特点是从基因水平上失控的、能无限增殖的细胞。癌细胞有三个显著的基本特征即:不死性、迁移性和失去接触抑制。

  实验室常用成瘤细胞

  常规较容易成瘤的细胞:Hep-G2(肝癌),Hep2(喉癌),NCI-H460(大细胞肺癌), A431(表皮癌),SK-OV-3(卵巢癌),MCF-7(乳腺癌)SKBR3, A375/B16-F10(人黑色素瘤细胞),SGC7901 人胃肿瘤细胞 ,KB人口腔表皮样癌细胞可以成瘤但是比较慢的细胞 CNE(鼻咽癌),A549(肺癌), SPC-A-1(肺腺癌), HT-29(结肠癌),BEL-7402(肝癌),MDA-MB-231 乳腺癌 , CT26 (小鼠结肠癌细胞 ),SH-SY5Y (人神经母细胞瘤细胞 ) , U251 (人胶质瘤细胞) , BGC-823(人胃癌细胞) ,PC-3 (人前列腺癌细胞)

  一些比较有争议的细胞 Hela(宫颈癌),HCT(人回盲肠癌细胞/人结直肠癌腺癌细胞)。其他:BMSC(骨髓间充质干细胞)认识裸鼠 无胸腺裸鼠(Nude Mouse,简称裸鼠)。目前已成为医学生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。特别是在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方面,它有着特殊的价值。 裸鼠(纯合子nu/nu突变鼠)主要表现为无毛(但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡)以及缺乏正常胸腺。杂合子小鼠(nn/+)各方面表现都正常。

  小鼠中有若干突变基因,它可产生一种为无毛的表现(phenotype),例如无胸腺裸鼠(Nude)、裸鼠(Naked)、无毛鼠(Hairless)、无鼻毛鼠(Rhinol),不要把这些突变鼠基因相互混淆。裸鼠的唯一特性是胸腺缺陷表现型,因此,不能将“裸鼠”与“无毛鼠”两词交换使用。

  裸小鼠:抵抗力差,易在SPF环境下可生存,所用的笼具、垫料、饲料、 饮水患病毒性肝炎和肺炎,因而饲养和繁殖要求条件比较严格,等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养,以保证长期存活并进行繁殖。 裸大鼠: 一般特征似裸小鼠,但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛,头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。

  裸鼠的选择

  虽然说以裸大鼠代替裸小鼠,具有移植肿瘤大,取血量多,可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定优越性,其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高,另外裸大鼠目前不怎么流行。所以我们实验室常用的是BALB/c-nu裸小鼠。

  随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加,故接种肿瘤实验一般采用4--6周龄的裸鼠。

  裸鼠成瘤

  裸鼠活体荧光

  注意事项

  (1)首先你要确定你的细胞能否成瘤,或者说成瘤效果好不好!这个一定要多查查文献

  (2)细胞接种量1*107/200ul/只,或者浓缩为1*107/100ul/只,根据肿瘤细胞成瘤效果调整细胞量,最高不要超过1*107。接种肿瘤实验一般采用4--6周龄的裸鼠,裸鼠太老会加大成瘤难度,放大个体差异。

  (3)接种的部位,根据个人经验,背部、腋下、颈部均可以,当然腋下和颈部效果最好。

  (4)接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针,要保证与接种点的距离小于针头的长度,向头部方穿行,绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层,接种最好在1小时之内完成,可以预先将细胞放在冰盒里暂为保存

  (5)鼠皮下种瘤后,可以通过应用免疫抑制剂,比如环磷酰胺(2mg每只,打两天)来加速瘤体的生长(我们实验室没试过)。

  (6)一般一周到两周即可观察到是否成瘤成功。成瘤成功后,我们实验室常规采用隔天测量肿瘤,最后再汇集数据绘制肿瘤生长曲线(如客户有要求另论)。

  (7)最后,不要担心裸鼠承受不了,大胆的的接种,要勤观察记录肿瘤生长情况以及裸鼠情况,成瘤很快,后续的记录和测量很慢。


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