可能的原因和对应的解决方案如下：

• 引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。

• 循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。

• 酶的用量偏高或酶的质量不好，应降低酶量或调换另一来源的酶。

• 退火温度偏低，退火及延伸时间偏长。应提高退火温度，减少变性与延伸时间，也可采用二种温度的 PCR 扩增。以 2 度为梯度设计梯度 PCR 反应优化退火温度。

• 样品处理不当。

• Mg²⁺ 浓度偏高，因适当调整 Mg²⁺ 使用浓度。

• 若为 PCR 试剂盒，也可能时试剂盒本身质量有问题。添加改良的DNA聚合酶，大大提高扩增产物的特异性和保真性。

一体化科研服务企业--华臻生物

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简介：浙江华臻生物技术有限公司是一家集生物医学基础研究、科研 产品研发销售于一体的科研服务公司。公司立足生物医学研究，致力于科研课题 服务，运用科研理念，促进医学研究的便捷和进步，落实医疗产品 的转化应用